期刊简介
《中华肿瘤杂志》1979年创刊，ISSN 0253-3766, CN 11-2152/R。现为月刊，每期80页。《中华肿瘤杂志》1999年获第一届国家期刊奖提名奖，2001年被列为中国期刊方阵双奖期刊。1992、1997和2003年分获第一、二、三届中国科协优秀科技期刊奖。2001—2008、2013年度获“百种中国杰出学术期刊”称号，2008、2011和2014年，入选第一、第二、第三届“中国精品科技期刊”。 2006—2011年连续6年入选中国科协精品科技期刊工程项目（B类），2012—2015年入选中国科协精品科技期刊工程项目期刊学术质量提升项目，2014—2015年获得中国科协精品科技期刊工程项目科技期刊出版人才国际培训项目。2012和2013年度分别入选“中国国际影响力优秀学术期刊”。多次获得中华医学会优秀期刊奖。
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首页>中华肿瘤杂志
- 杂志名称：中华肿瘤杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-3766
- 国内刊号：11-2152/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：科协优秀期刊二等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 医学文摘, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 文摘与引文数据库, 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), 上海图书馆馆藏
芳香化酶抑制剂来曲唑耐药的乳腺癌细胞模型的建立
陈洪岩；刘芝华
关键词：芳香化酶, 来曲唑, 抗药性, 肿瘤, MCF-7细胞
摘要：目的 建立稳定过表达芳香化酶的MCF-7细胞(MCF-7-aromatase)和芳香化酶抑制剂来曲唑耐药的MCF-7细胞(MCF-7-LR)模型.方法 采用慢病毒介导的基因转染方法建立MCF-7-aromatase细胞及稳定过表达绿色荧光蛋白(GFP)的MCF-7细胞(MCF-7-GFP).采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR、Western blot法以及免疫沉淀法,检测和验证MCF-7-aromatase 和MCF-7-GFP细胞中aromatase基因的表达.通过WST-1细胞增殖实验,检测MCF-7-aromatase和MCF-7-GFP细胞在睾酮和雌二醇作用下的体外增殖能力,以及MCF-7-aromatase细胞在来曲唑作用下的增殖能力.应用GraphPad Prism软件通过非线性回归法拟合剂量反应曲线,计算来曲唑对MCF-7-aromatase细胞的半数抑制浓度(IC50).将MCF-7-aromatase细胞持续培养在睾酮和来曲唑的培养液中,经过筛选获得来曲唑耐药细胞MCF-7-LR,通过WST-1法检测耐药细胞对来曲唑的耐药性.结果 RT-PCR和实时荧光定量RCR检测结果显示,MCF-7-aromatase细胞中aromatase mRNA的表达量明显高于MCF-7-GFP细胞.Western blot法和免疫沉淀法检测结果均显示,MCF-7-aromatase细胞中aromatase蛋白的表达水平明显高于MCF-7-GFP细胞.WST-1法检测结果显示,经1和10 nmol/L睾酮处理后,MCF-7-aromatase细胞的增殖率分别为溶剂对照组的1.43和1.53倍；经1和10 nmol/L雌二醇处理后,MCF-7-aromatase细胞的增殖率分别为溶剂对照组的1.41和1.55倍.经10 nmol/L睾酮处理后,MCF-7-GFP细胞的增殖率为溶剂对照组的1.12倍.经1和10 nmol/L雌二醇处理后,MCF-7-GFP细胞的增殖率分另为溶剂对照组的1.41和1.51倍.来曲唑以剂量依赖方式抑制睾酮诱导的MC F-7-aromatase细胞的增殖,对MCF-7-aromatase细胞的IC50约为5.3 nmol/L,而对MCF-7-LR细胞的增殖没有显著抑制作用(IC50＞ 1000 nmol/L).结论 成功建立了来曲唑耐药的乳腺癌细胞模型MCF-7-LR,为研究来曲唑的耐药机制奠定了重要的实验基础.
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