间质干细胞对顺铂诱导人乳腺癌细胞凋亡的作用

摘要：目的 分离、培养、鉴定乳腺癌来源间质干细胞(BC-MSCs)及癌旁组织来源间质干细胞(BN-MSCs),探讨其对顺铂(DDP)诱导的人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响. 方法 采用组织贴壁法分离培养BC-MSCs和BN-MSCs,成骨、成脂诱导法检测BC-MSCs的分化能力,流式细胞术检测BC-MSCs和BN-MSCs的表面标记.收集BC-MSCs和BN-MSCs 48 h培养上清液, 分别与DDP共同处理MCF-7细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验检测不同处理组MCF-7细胞增殖抑制率,Muse全能细胞分析仪检测MCF-7细胞凋亡和活力情况,Luminex液态芯片技术检测MSCs培养上清中白细胞介素6(IL-6)水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同处理组MCF-7细胞中IL-6 mRNA的表达水平. 结果 成功分离培养出 BC-MSCs和BN-MSCs, 镜下呈纤维样长梭形,高表达CD29、CD44,不表达CD14、CD34,诱导后可分化为脂肪细胞和成骨细胞.2.5、5、10、20、40、80 μmol/L DDP作用MCF-7细胞48 h后,DDP组的细胞抑制率分别为(17.33±2.00)%、(22.37±0.73)%、(30.77±1.23)%、(44.93±1.27)%、(62.03±1.97)%和(73.93±1.10)%, DDP+BC-MSCs组的细胞抑制率分别为(8.27±0.63)%、(11.50±1.30)%、(20.57±0.93)%、(32.60±1.90)%、(52.27±0.73)%和(62.13±2.17)%, DDP+BN-MSCs组的细胞抑制率分别为(12.90±1.60)%、(16.53±2.87)%、(25.90±1.50)%、(39.40±2.40)%、(57.40±0.70)%和(69.03±1.07)%, DDP+BC-MSCs组的细胞抑制率明显低于DDP组,差异有统计学意义(P<0.05).DDP组、DDP+BC-MSCs组和DDP+BN-MSCs组的细胞凋亡率分别为(47.77±1.98)%、(29.20±2.12)% 和(37.92±2.21)%,DDP+BC-MSCs组与DDP组差异有统计学意义(P<0.05).DDP组、DDP+BC-MSCs组和DDP+BN-MSCs组的细胞活力比值分别为0.52±0.02、0.72±0.02和0.64±0.02,DDP+BC-MSCs组与DDP组差异有统计学意义(P0.05).Luminex液态芯片分析结果显示,BC-MSCs组的IL-6水平是BN-MSCs组的(2.50±0.68)倍,差异有统计学意义(P<0.05).DDP组和DDP+BC-MSCs组的IL-6 mRNA相对表达量分别为1.02±0.10和7.58±0.55,差异有统计学意义(P<0.01).DDP+BC-MSCs组和DDP+BC-MSCs+IL-6中和抗体组的细胞凋亡率分别为(27.41±1.95)%和(42.45±2.87)%,差异有统计学意义(P<0.05).DDP+BC-MSCs组和DDP+BC-MSCs+IL-6中和抗体组的细胞活力分别为(72.40± 2.60)%和(59.76±3.89)%,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 成功地分离、培养出BC-MSCs和BN-MSCs.与BN-MSCs比较,BC-MSCs能够改善DDP对MCF-7细胞的作用,显著减少DDP诱导MCF-7细胞的凋亡,促进增殖与活力,且与其分泌的IL-6有关.